(单)双荧光素酶检测
荧光素酶报告基因检测是通过分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件(如启动子、增强子和沉默子等)和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。通过萤火虫荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶,并以海肾荧光素酶为本底对照。荧光素酶在Mg2+和O2参与下催化荧光素氧化成oxyluciferin,在荧光素氧化过程中,发出生物荧光(bioluminomescence)。通过液闪测定仪测定生物荧光。
一、服务内容
1、荧光素酶报告基因载体的构建
2、荧光素酶报告基因载体的转染
3、单/双荧光素酶报告基因的检测
4、基于双荧光素酶报告实验的信号转导检测
细胞信号转导的调节(抑制或增强)
目的蛋白对已知蛋白的调控
启动子/增强子检测
病毒/细胞相互作用
转录因子(IFN, NF-KB, IRF等)
药物诱导作用或效果
各种射线处理对细胞因子的调控研究
5、药物处理,紫外照射等各种条件刺激后荧光素酶检测
6、预实验及正式实验服务
二、样品要求(样品处理及保存见附件)
1、基因组DNA或其它需扩增目的片段的核酸样品
2、处理后的细胞等待提取核酸的样品
三、客户提供材料
1、核酸样品,Promega检测试剂盒
2、待扩增基因或非编码区信息
3、相关文献(可选)
四、提交给客户结果
1、含有Luc/Rluc的DNA载体,
2、荧光素酶过表达细胞株
3、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶检测值
4、完整实验报告
五、服务说明
1、可直接提供核酸,也可提供待测样品;
2、荧光素酶载体由公司提供,如需特殊荧光素酶载体由客户提供;
3、海肾荧光素酶本底载体由公司提供(pRL-TK),如需特殊本底需提前说明并由客户提供。
六、对照设置
1、空白:无任何荧光素酶表达
2、阴性对照:仅表达海肾荧光素酶
3、阳性对照:仅表达萤火虫荧光素酶